News Details
您现在的位置:主页>>行业动态>变性梯度凝胶电泳的原理是什么
变性梯度凝胶电泳的原理是什么
来源:时间:2019-03-07
变性梯度凝胶电泳的原理是什么
变性梯度凝胶电泳是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm)。
Tm值主要取决于DNA分子中GC含量的多少。DGGE将凝胶设置在双重变性条件下:温度50~60℃,变性剂0~100%。当一双链DNA片段通过一变性剂浓度呈梯度增加的凝胶时,此片段迁移至某一点变性剂浓度恰好相当于此段DNA的低熔点区的Tm值,此区便开始熔解,而高熔点区仍为双链。
这种局部解链的DNA分子迁移率发生改变,达到分离的效果。Tm的改变依赖于DNA序列,即使一个碱基的替代就可引起Tm值的升高和降低。因此,DGGE可以检测DNA分子中的任何一种单碱基的替代、移码突变以及少于10个碱基的缺失突变。
作为一种突变检测技术,DGGE具有如下的优点:
(1)突变检出率高。DGGE 的突变检出率为99%以上。
(2)检测片段长度可达1kb,尤其适用于100~500bp的片段。
(3)非同位素性。DGGE不需同位素掺入,可避免同位素污染及对人体造成的伤害。
(4)操作简便、快速。DGGE一般在24小时内即可获得结果。
(5)重复性好。但是,该方法需要特殊的仪器,而且合成带GC夹的引物也比较昂贵。
上一条:琼脂糖凝胶电泳的原理是什么
下一条:实验室仪器中玻璃器皿用途有哪些
相关标签:
相关新闻
RELATED NEWS
- 众立生物产品推荐|雅马拓旋转蒸发仪2023-12-11
- 多功能酶标仪的维护工作2021-12-24
- 组织研磨仪的使用2021-12-10
- 实验室先进型图像分析视频熔点仪 | 华志 HMZX-1A2021-11-25
相关产品