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流式细胞仪使用注意事项有什么

来源:http://www.tjzhlbio.com/news/89.html时间:2020-08-31


       流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说,它的细节 分辨率为零。

流式细胞仪检测技术可应用于:(1)分离和鉴定细胞群及亚群;(2)分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量;(3)分析细胞内抗原物质。

        流式细胞仪是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置,由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物,因此,用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪,是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。

注意事项
1.  减少非特异荧光染色
(1)细胞的活性和状态:流式细胞仪不但可探测细胞表面的荧光,也可探测细胞内的荧光。因此,如果要检测细胞表面的分子,一定要保证细胞的活性,还应尽可能保持细胞静止,通常在4度进行操作。否则,荧光抗体进入死细胞内,会产生非特异结果。
(2)封闭抗体的应用是必不可少的,因为大多数的免疫细胞表面都表达有Fc-R。细胞与抗体相互作用后,一定要用FACS缓冲液洗2~3次,以除去游离的抗体。
2.  单染色时以FACS最常用,FITC标记抗体荧光比较稳定而且价格合适。
3.  如果同时要检测两种以上的分子,一定要选择不同波长的荧光所标记的抗体。 


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