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液相色谱系统简要介绍

来源:http://www.tjzhlbio.com/news/26.html时间:2019-04-08

      液相色谱系统简要介绍

       高效液相色谱法由于其分离效率高、选择性好,检测灵敏度高,操作自动化,应用范围广等特点成为广大分析工作者的分析方法。流动相承担液相分离作用的重要作用,是液相色谱柱系统的大脑。能否选择合适的流动相,影响整个分析工作的质量。掌握流动相选择的理论知识对于分析工作者特别是药物分析工作者是非常必要的。选择用于分析的合适的流动相是一件难以确定和非常困难的任务。虽然没有有关流动相选择的简易技巧、捷径、窍门或秘诀,但却有些理论来简化此过程,反相高效液相色谱流动相一般是由水相和有机相组成。

      有机相是反相高效液相色谱系统流动相重要组成部分,对HPLC分离起到决定性作用。典型的反相高效液相色谱系统的有机相有:乙腈、甲醇、四氢呋喃、异丙醇、DMF,乙醇等。
      当被分析化合物在反相色谱体系中极容易离解(一般是具有氨基或羧基官能团化合物)或者被分析化合物pKa值小于2.0或pKb值大于8.0时,被分析物在流动相中分子态比例相比于离子态不能占据绝对优势,固定相表面残留硅醇基团与带电离子相互作用,导致峰形难看或拖尾。而此时一般缓冲液不能抑制被分析化合物离子化,就需要加入缓冲盐体系使得被分析化合物的离子平衡向“中性”形式移动,利于在反相系统中的分配,此外缓冲盐体系能“覆盖”残留硅醇基团,阻止其吸附被分析化合物分子和参与离子保留。
 

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